摘要：本發(fā)明公開了一種用于表達T4連接酶的家蠶中部絲腺生物反應器雙啟動子通用型質(zhì)粒及其應用與方法。質(zhì)粒以piggyBac轉(zhuǎn)座子為基礎(chǔ)并帶有Amp抗性基因，包含有作為外源基因的T4連接酶基因和作為標記基因的綠色熒光EGFP基因的功能表達框，質(zhì)粒用分子生物學方法構(gòu)建，且DDDDK與絲素輕鏈基因polyA之間含有ApaI和NheI專一性的兩個酶切位點，采用ApaI和NheI雙酶切通用型質(zhì)粒，與T4連接酶基因連接后，與輔助質(zhì)粒共同注射到家蠶受精卵內(nèi)，利用轉(zhuǎn)座子特性使綠色熒光蛋白基因和T4連接酶基因?qū)氲郊倚Q基因組內(nèi)，并穩(wěn)定遺傳和表達，獲得轉(zhuǎn)基因家蠶。本發(fā)明借助熒光標志基因篩選轉(zhuǎn)基因家蠶，利用該家蠶絲腺細胞特異地合成分泌T4連接酶蛋白。
- 專利類型發(fā)明專利
- 申請人浙江大學;
- 發(fā)明人鐘伯雄;張玉玉;葉露鵬;
- 地址310027 浙江省杭州市西湖區(qū)浙大路38號
- 申請?zhí)?/b>CN201610296590.6
- 申請時間2016年05月04日
- 申請公布號CN105907786A
- 申請公布時間2016年08月31日
- 分類號C12N15/85(2006.01)I;C12N15/65(2006.01)I;C12N15/66(2006.01)I;A01K67/04(2006.01)I;
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