摘要：本發(fā)明涉及生物技術(shù)領(lǐng)域，旨在提供一種分子標(biāo)記豬瘟病毒弱毒疫苗的構(gòu)建方法。本發(fā)明以含有豬瘟病毒疫苗C株基因組5’半長的重組質(zhì)粒pA?F123和含有BVDV?VEDEVAC株Erns基因的重組質(zhì)粒pE?B?Erns為模板，在兩端設(shè)計(jì)20bp同源片段，使用一步定向克隆試劑盒，獲得重組pA?B?Erns?F123質(zhì)粒；用BamH?I和Sal?I將含有豬瘟病毒疫苗C株基因組3’半長的F456片段從重組質(zhì)粒pB?F456中切下，克隆于相同酶作用的pA?B?Erns?F123中，獲得重組質(zhì)粒pA?B?Erns?FL。本發(fā)明的反向遺傳操作技術(shù)的建立為研究CSFV基因功能和新型疫苗開辟了新的途徑。利用反向遺傳操作技術(shù)將外源標(biāo)簽插入病毒基因組可以用來研究病毒的復(fù)制、病毒編碼蛋白的功能及抗病毒藥物的篩選，使用RNA聚合酶Ⅱ系統(tǒng)能夠高效和穩(wěn)定地拯救豬瘟病毒感染性cDNA克隆。
- 專利類型發(fā)明專利
- 申請人浙江大學(xué);
- 發(fā)明人方維煥;廖迅;李肖梁;
- 地址310058 浙江省杭州市西湖區(qū)余杭塘路866號
- 申請?zhí)?/b>CN201610224932.3
- 申請時間2016年04月12日
- 申請公布號CN105886531A
- 申請公布時間2016年08月24日
- 分類號C12N15/85(2006.01)I;C12N15/40(2006.01)I;C12N7/01(2006.01)I;A61K39/187(2006.01)I;A61P31/14(2006.01)I;
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