摘要：本發(fā)明公開了一種雞生長激素重組蛋白在畢赤酵母中的表達(dá)及純化方法，包括以下步驟：(1)從雞垂體中提取總RNA并做反轉(zhuǎn)錄PCR得到其cDNA，以cDNA為模板，PCR得到雞生長激素的基因片段；(2)利用畢赤酵母構(gòu)建重組表達(dá)載體pPIC9K-cGH；(3)重組表達(dá)載體pPIC9K-cGH電轉(zhuǎn)化畢赤酵母GS115，篩選得到轉(zhuǎn)基因重組酵母菌株GS115-pPIC9K-cGH；(4)通過甲醇誘導(dǎo)表達(dá)，并純化得到雞生長激素重組蛋白，通過細(xì)胞活性試驗(yàn)鑒定其活性。本發(fā)明首次實(shí)現(xiàn)雞生長激素(cGH)重組蛋白在畢赤酵母中的高效表達(dá)，并建立了純化體系，可得到純度較高的具有活性的雞生長激素重組蛋白。該方法操作簡便、產(chǎn)量高、成本低廉，為進(jìn)一步研究雞生長激素的結(jié)構(gòu)、功能以及生產(chǎn)應(yīng)用提供了基礎(chǔ)。
- 專利類型發(fā)明專利
- 申請(qǐng)人常熟理工學(xué)院;
- 發(fā)明人郁建鋒;顧志良;何賽;張艷萍;金澤楷;周歡慶;姚麗娟;
- 地址215500 江蘇省蘇州市常熟市南三環(huán)路99號(hào)
- 申請(qǐng)?zhí)?/b>CN201610091768.3
- 申請(qǐng)時(shí)間2016年02月19日
- 申請(qǐng)公布號(hào)CN105695500A
- 申請(qǐng)公布時(shí)間2016年06月22日
- 分類號(hào)C12N15/81(2006.01)I;C07K14/61(2006.01)I;C07K1/16(2006.01)I;C12R1/84(2006.01)N;
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