摘要：本發(fā)明提供了一種pPIC9?ompA?Fc重組質(zhì)粒、構(gòu)建方法、表達(dá)及其應(yīng)用，屬于基因工程技術(shù)領(lǐng)域，以禽波氏桿菌DNA及以雞脾臟mRNA為模版合成的cDNA為模版，通過PCR分別獲得ompA?linker基因和雞IgY?Fc?linker基因，再將兩份PCR產(chǎn)物進(jìn)行SOE?PCR得到ompA?linker?Fc融合基因，將融合基因連接至PMD18?T克隆質(zhì)粒，連接轉(zhuǎn)化后對重組質(zhì)粒進(jìn)行測序，雙酶切并連接至表達(dá)質(zhì)粒pPIC9中，將連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)化受體菌，最后鑒定陽性轉(zhuǎn)化子，獲得pPIC9?ompA?Fc融合質(zhì)粒。本發(fā)明成功克隆禽波氏桿菌ompA及雞IgY?Fc，并將兩種基因成功融合至表達(dá)質(zhì)粒，實(shí)現(xiàn)了重組質(zhì)粒畢赤酵母高效表達(dá)，成本低廉，增強(qiáng)了融合蛋白的活性。
- 專利類型發(fā)明專利
- 申請人山東農(nóng)業(yè)大學(xué);
- 發(fā)明人朱瑞良;魏凱;胡莉萍;董雯雯;黃河;劉麗萍;李鑫;于翠蓮;張浩;
- 地址271018 山東省泰安市泰山區(qū)岱宗大街61號
- 申請?zhí)?/b>CN201610717365.5
- 申請時間2016年08月24日
- 申請公布號CN106222192A
- 申請公布時間2016年12月14日
- 分類號C12N15/81(2006.01)I;C12N15/66(2006.01)I;C12N15/62(2006.01)I;C07K19/00(2006.01)I;A61K48/00(2006.01)I;A61K39/10(2006.01)I;A61P31/04(2006.01)I;
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