摘要：本發(fā)明提供一種人類乳頭瘤病毒HPV?8E7蛋白的表達(dá)純化方法，通過(guò)設(shè)計(jì)HPV?8E7的擴(kuò)增引物，并從HPV?8E7質(zhì)粒中有效擴(kuò)增出這個(gè)基因，插入到載體pGEX?4T2和pEGFP?C1中，獲得重組載體，轉(zhuǎn)染，收集上清與4B磁珠結(jié)合，再用凝血酶切除GST標(biāo)簽，獲取HPV?8E7蛋白，行多點(diǎn)免疫，獲得純化的多克隆抗體。本發(fā)明增加了該蛋白原核表達(dá)時(shí)的可溶性，從而降低下游大規(guī)模生產(chǎn)成本以及分離純化難度，在提高表達(dá)量的同時(shí)也有利于分離純化，使該蛋白在工業(yè)化放大生產(chǎn)時(shí)降低難度，減少成本，并經(jīng)純化、免疫，得到高特異性、高效價(jià)比的多克隆抗體，能大大提高檢測(cè)的準(zhǔn)確率，為進(jìn)一步研究治療宮頸癌等疾病奠定基礎(chǔ)。
- 專利類型發(fā)明專利
- 申請(qǐng)人浙江大學(xué);
- 發(fā)明人程浩;陳賢禎;韓睿;朱可建;周強(qiáng);丁楊;
- 地址310027 浙江省杭州市西湖區(qū)浙大路38號(hào)
- 申請(qǐng)?zhí)?/b>CN201410194991.1
- 申請(qǐng)時(shí)間2014年05月11日
- 申請(qǐng)公布號(hào)CN104059934B
- 申請(qǐng)公布時(shí)間2016年09月14日
- 分類號(hào)C12N15/70(2006.01)I;C07K16/08(2006.01)I;
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