摘要：本發(fā)明提供一種適用于豬瘟病毒C株弱毒疫苗脾淋源和細(xì)胞源病毒含量定量檢測(cè)的熒光定量PCR快速診斷試劑盒及其制備方法。102拷貝/μL的總RNA即能得到特異性擴(kuò)增，在107～102拷貝/μL線性范圍內(nèi)有良好的擴(kuò)增曲線，適用于豬瘟弱毒疫苗成品及半成品的效價(jià)估測(cè)。本發(fā)明所使用的豬瘟病毒特異引物是在其高度保守的5’端非編碼區(qū)(5’-UTR)設(shè)計(jì)合成的2條引物：P1(5′-GCAGAAGCCCACCTCGAGAT-3′)為豬瘟病毒特異性上游引物，P2(5′-TACACCGGTTCCTCCACTCC-3′)為豬瘟病毒特異性下游引物，預(yù)期擴(kuò)增產(chǎn)物245?bp，熒光定量PCR反應(yīng)呈現(xiàn)特征性S形擴(kuò)增動(dòng)力曲線，熔解曲線分析顯示出現(xiàn)單特異峰。該方法只能檢測(cè)CSFV，不與BVDV發(fā)生交叉反應(yīng)。
- 專利類型發(fā)明專利
- 申請(qǐng)人山東綠都生物科技有限公司;
- 發(fā)明人沈志強(qiáng);李安;謝金文;王金良;郭顯坡;
- 地址256600 山東省濱州市黃河二路169號(hào)
- 申請(qǐng)?zhí)?/b>CN201110152527.2
- 申請(qǐng)時(shí)間2011年06月08日
- 申請(qǐng)公布號(hào)CN102816863A
- 申請(qǐng)公布時(shí)間2012年12月12日
- 分類號(hào)C12Q1/70(2006.01)I;C12Q1/68(2006.01)I;C12N15/11(2006.01)I;C12N15/63(2006.01)I;C12R1/93(2006.01)N;
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