摘要：本發(fā)明涉及一種實時熒光定量RT-PCR反應結(jié)合熔解曲線分析鑒別豬瘟強毒與疫苗弱毒的方法。設(shè)計合成了3條引物，P1/P3可特異性擴增豬瘟病毒強毒株，預期擴增產(chǎn)物為549bp，Tm值為89.5±0.5℃；P2/P3可特異性擴增豬瘟兔化弱毒疫苗株，預期擴增產(chǎn)物為164bp，Tm值為84.5±0.5℃。在最優(yōu)條件下進行熒光定量RT-PCR反應和復合熒光定量RT-PCR反應，最終成功建立了能夠鑒別區(qū)分豬瘟野毒與疫苗毒的熒光定量RT-PCR方法。不僅可以根據(jù)熔解曲線波峰的多少確定是否有非特異性PCR產(chǎn)物，還可根據(jù)波峰峰頂對應的溫度進一步確定產(chǎn)物的特異性。本方法可以根據(jù)熔解曲線立即判斷發(fā)病豬是強毒或者弱毒疫苗感染，減少了未感染免疫豬被誤殺的可能性，具有很高的科研與臨床應用價值。
- 專利類型發(fā)明專利
- 申請人山東綠都生物科技有限公司;
- 發(fā)明人沈志強;謝金文;李安;王金良;苗立中;
- 地址256600 山東省濱州市黃河二路169號
- 申請?zhí)?/b>CN201110143039.5
- 申請時間2011年05月30日
- 申請公布號CN102808040A
- 申請公布時間2012年12月05日
- 分類號C12Q1/70(2006.01)I;C12Q1/68(2006.01)I;G01N21/64(2006.01)I;
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