教育裝備采購(gòu)網(wǎng)訊：自央視3·15曝光雙匯瘦肉精豬肉以來(lái)，引起廣泛關(guān)注，“瘦肉精”成為網(wǎng)絡(luò)搜索的熱門詞匯，也一直是大家關(guān)注的民生問(wèn)題。
瘦肉精是一類動(dòng)物用藥，將瘦肉精添加于飼料中，可以增加動(dòng)物的瘦肉量、減少飼料使用、使肉品提早上市、降低成本。在中國(guó)，通常所說(shuō)的“瘦肉精”則是指克倫特羅，它曾經(jīng)作為藥物用于治療支氣管哮喘，后由于其副作用太大而遭禁用。目前，能夠?qū)崿F(xiàn)這種功能的物質(zhì)是一類叫做β-受體激動(dòng)劑的藥物，例如萊克多巴胺和沙丁胺醇等，同樣能起到“瘦肉”作用、卻對(duì)人體健康危害過(guò)大，因而造成安全隱患。它們也因而在全球遭到禁用。分子式：C12-H18-Cl2-N2-O。白色或類白色的結(jié)晶粉末，無(wú)臭、味苦，熔點(diǎn)161℃，溶于水、乙醇，微溶于丙酮，不溶于乙醚。
瘦肉精按照GB/T 5009.192-2003 動(dòng)物性食品中克倫特羅殘留量的測(cè)定方法進(jìn)行檢測(cè)。常見(jiàn)的檢測(cè)方法有以下幾種：
氣相色譜-質(zhì)譜法(GC-MS)
GC-MS法優(yōu)點(diǎn)是把色譜高效快速的分離效果和質(zhì)譜高靈敏度的定性分析有機(jī)合起來(lái)，能在多種殘留物同時(shí)存在的情況下對(duì)某種特定的殘留物進(jìn)行定性、定量分析，而且具更高的檢測(cè)極限。另外，GC-MS法與HPLC法相比，檢測(cè)靈敏度更高，假陽(yáng)性率更低。因此，我國(guó)將GC-MS法定為檢測(cè)CLB的確證性方法(NY/T468~2001)。
島津上海分析中心推出了基于GC -MS法的克倫特羅檢測(cè)方案。GC-MS法具有靈敏度高、假陽(yáng)性率低的特點(diǎn)，常用作篩選后陽(yáng)性樣品的確證。本方案針對(duì)鹽酸克倫特羅的化學(xué)性質(zhì)，建立了C18小柱和聚(甲基丙烯酸-乙二醇二甲基丙烯酸酯)整體柱二維萃取的方法。樣品提取后，用C18小柱和聚(甲基丙烯酸-乙二醇二甲基丙烯酸酯)整體柱進(jìn)一步富集凈化，經(jīng)N ,O-雙三甲基硅烷三氟乙酰胺 (BSTFA) 衍生，選擇離子監(jiān)測(cè)方式進(jìn)行氣相色譜質(zhì)譜測(cè)定。該方法以克倫特羅同位素(Clenbuterol-D9) 為內(nèi)標(biāo)，內(nèi)標(biāo)法定量。豬肉中克倫特羅的檢出限為0.13 μg/kg，在0.5～50 μg/kg的濃度范圍內(nèi)具有良好的線性關(guān)系，r大于0.999。日內(nèi)、日間相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差不高于20%，加標(biāo)回收率大于75%。結(jié)果表明，該方法簡(jiǎn)單、快速、靈敏度高、重現(xiàn)性好，適用于豬肉中克倫特羅的測(cè)定。
高效液相色譜法(HPLC)
HPLC適合測(cè)定熱不穩(wěn)定和強(qiáng)極性的β-激動(dòng)劑及其代謝產(chǎn)物，而且，HPLC可以與柱前提取、純化及柱后熒光衍生化反應(yīng)和質(zhì)譜(MS)等系統(tǒng)聯(lián)用，容易實(shí)現(xiàn)分析過(guò)程的自動(dòng)化。目前，我國(guó)已將HPLC法作為檢測(cè)CLB殘留的半確證性方法，最低檢測(cè)限范圍為1～15ng/g，其優(yōu)點(diǎn)是專屬性好、選擇性強(qiáng)、檢測(cè)精確度較高，而且假陽(yáng)性率低;缺點(diǎn)是樣品處理時(shí)間長(zhǎng)，檢測(cè)。
禾工科學(xué)儀器推出STI5000系列液相色譜儀(HPLC)檢測(cè)肉制品中瘦肉精。本方法在豬的肌肉和肝臟組織中的檢測(cè)限為0.001ug/g’回收率范圍為80%±20%。
酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA )
利用免疫學(xué)抗原抗體特異性結(jié)合和酶的高效催化作用，通過(guò)化學(xué)方法將植物辣根過(guò)氧化物酶(HRP)與克倫特羅(CL)結(jié)合，形成酶偶聯(lián)克倫特羅。將固相載體上已包被的抗體(羊抗兔IgG抗體)與特異性的抗克倫特羅抗體結(jié)合，然后加入待測(cè)克倫特羅和酶偶聯(lián)克倫特羅，它們競(jìng)爭(zhēng)性與克倫特羅抗體結(jié)合，洗滌后加底物，根據(jù)有色物的變化計(jì)量待測(cè)克倫特羅量。若待測(cè)克倫特羅多，則被結(jié)合的酶偶聯(lián)克倫特羅少，有色物量就少。用目測(cè)法或比色法測(cè)定樣品中的克倫特羅含量，比色的最佳波長(zhǎng)為450 nm，參比波長(zhǎng)應(yīng)大于600 nm。酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)具有檢測(cè)速度快、靈敏度高的特點(diǎn)，適用于現(xiàn)場(chǎng)定性快速檢測(cè)。
適合進(jìn)行瘦肉精檢測(cè)的酶標(biāo)儀型號(hào)—Biochrom Anthos zenyth 340rt 酶標(biāo)儀
推薦理由：
波長(zhǎng)范圍：340-750nm---滿足測(cè)定需要的波長(zhǎng)范圍
讀數(shù)范圍：0.000-4.000 OD—滿足讀數(shù)結(jié)果范圍
讀板速度：18秒/96孔—檢測(cè)速度快
控溫范圍:室溫+4-45℃--試劑盒最佳反應(yīng)溫度為25℃，帶有控溫功能的酶標(biāo)儀可以使讀數(shù)結(jié)果更加準(zhǔn)確
震蕩模式：3種速度—滿足需要震蕩使反應(yīng)進(jìn)行的更加充分，結(jié)果更加準(zhǔn)確
標(biāo)配濾光片：340、405、450、492、620nm—滿足測(cè)量波長(zhǎng)450nm和參比波長(zhǎng)620nm，還可以進(jìn)行紫外檢測(cè)
內(nèi)置軟件：ADAP Basic軟件—可儲(chǔ)存和輸出結(jié)果，滿足數(shù)據(jù)處理
膠體金免疫層析法(Colloidal gold immunochromatography)
利用競(jìng)爭(zhēng)法膠體金免疫層析技術(shù)，檢測(cè)液中的Clen與金標(biāo)墊上的金標(biāo)抗體結(jié)合形成復(fù)合物，若Clen在檢測(cè)液中濃度低于靈敏度值，未結(jié)合的金標(biāo)抗體流到T區(qū)時(shí)，被固定在膜上的Clen-BSA偶聯(lián)物結(jié)合，逐漸凝集成一條可見(jiàn)的T線;若Clen濃度高于靈敏度值，金標(biāo)抗體全部形成復(fù)合物，不會(huì)再與T線處Clen-BSA偶聯(lián)物結(jié)合形成可見(jiàn)T線。未固定的復(fù)合物流過(guò)T區(qū)被C區(qū)的二抗捕獲并形成可見(jiàn)的C線。C線出現(xiàn)則表明免疫層析發(fā)生，即試紙有效.
鹽酸克侖特羅(瘦肉精)快速檢測(cè)卡(操作方便快捷，市民自己就可以操作)采用競(jìng)爭(zhēng)抑制免疫層析技術(shù)的原理來(lái)測(cè)定動(dòng)物尿液、組織和飼料中的鹽酸克侖特羅。試劑含有被預(yù)先固定于膜上檢測(cè)帶(T)的鹽酸克侖特羅偶聯(lián)物和被膠體金標(biāo)記的抗鹽酸克侖特羅單克隆抗體。檢測(cè)時(shí)樣品和標(biāo)記抗體競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合偶聯(lián)物。檢測(cè)限為3ng/ml(3ppb)。
液相色譜—質(zhì)譜/質(zhì)譜法(HPLC-MS/MS)
參見(jiàn)SN/T 1924—2007 進(jìn)出口動(dòng)物源食品中克倫特羅、萊克多巴胺、沙丁胺醇、特布他林殘留量的檢測(cè)方法。
本標(biāo)準(zhǔn)適用于動(dòng)物源性食品肌肉和內(nèi)臟中克倫特羅、萊克多巴胺、沙丁胺醇、特布他林殘留量的檢測(cè)。
試樣中的藥物殘留采用pH5.2的乙酸銨緩沖液提取，同時(shí)加入β-鹽酸葡萄糖醛甙酶-芳基硫酯酶進(jìn)行酶解后，提取液經(jīng)C18和SCX雙SPE柱凈化，液相色譜—質(zhì)譜進(jìn)行測(cè)定，內(nèi)標(biāo)法定量。
過(guò)程煩瑣、難于操作，需貴重儀器，在實(shí)際應(yīng)用中受到一定的限制。
近期，島津推出聯(lián)用超高效液相色譜儀LC-30A和三重四極桿質(zhì)譜儀LCMS-8030測(cè)定豬肉中克倫特羅、萊克多巴胺和沙丁胺醇的方法。
使用島津超高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用法檢測(cè)豬肉中克倫特羅、萊克多巴胺和沙丁胺醇的方法，首先，在樣品經(jīng)提取后，用超高效液相色譜LC-30A快速分離，三重四極桿質(zhì)譜儀LCMS-8030進(jìn)行定量分析。本方法分析速度快，精密度良好，線性范圍寬(0.05～100 ng/mL)，校準(zhǔn)曲線的相關(guān)系數(shù)在0.999以上。方法定量限滿足國(guó)標(biāo)0.5 μg/kg的要求，并且對(duì)于豬肉中克倫特羅的檢測(cè)方法定量限可以達(dá)到0.05 μg/kg，檢測(cè)靈敏度完全符合日本肯定列表的要求。
