Western失敗找不到原因?可能是轉(zhuǎn)膜時久沒有轉(zhuǎn)膜成功!
電泳是否已經(jīng)跑出目的條帶?若根沒沒跑出條帶那就沒必要浪廢作后免的western
轉(zhuǎn)膜效率太低甚至失???優(yōu)化出轉(zhuǎn)膜條件
免染色直接成像分析:蛋白電泳時無需染色直接實(shí)時凝膠成像,可以再轉(zhuǎn)膜前就先預(yù)判下蛋白表達(dá),觀查凝膠上的蛋白再轉(zhuǎn)膜前后的濃度,以幫助更精確的轉(zhuǎn)膜。而現(xiàn)有的技術(shù)之能對轉(zhuǎn)膜后的凝膠進(jìn)行考馬斯亮蘭染色觀察殘留蛋白,不能進(jìn)行轉(zhuǎn)膜前后的濃度對比。
做western之前預(yù)成像:觀察是否在目標(biāo)區(qū)域跑出條帶,如果凝膠時在目標(biāo)區(qū)域附近跑不出任何條帶,說明前期的樣品出理/準(zhǔn)備出了問題,需要再重新優(yōu)化之前的實(shí)驗(yàn)流程以跑出目地蛋白。也不用再做后續(xù)的western流程,省去了大量的一抗二抗成本和時間工作
優(yōu)化轉(zhuǎn)膜條件:免染色觀察轉(zhuǎn)膜效率,比如轉(zhuǎn)膜前先觀查下凝膠上的蛋白條帶濃度,轉(zhuǎn)膜后再觀察下殘留的蛋白濃度,比較下轉(zhuǎn)膜前后的蛋白殘留比例,從而可以換算剛好蛋白都轉(zhuǎn)到膜上的轉(zhuǎn)膜時間條件。
在垂直板電泳(蛋白電泳)的同時直接實(shí)時成像分析,無需任何染色脫色,通過紫外成像技術(shù)直接成像。將原來整個電泳加染色成像時間從兩小時縮短為30分鐘;
高分辨、高靈敏:可以實(shí)現(xiàn)多肽的寡糖的電泳成像
省成本:免除電泳染色-脫色環(huán)節(jié),免除有毒有害試劑使用,免除凝膠成像、實(shí)驗(yàn)通風(fēng)櫥以及污水收集設(shè)施,減少了電泳廢棄物環(huán)保處理費(fèi)用;
電泳圖譜與實(shí)際考馬斯染色一致,與色譜一致,不改變用戶習(xí)慣;
適用范圍:
蛋白抗體藥物純度檢測、蛋白抗體藥物定量分析,雜質(zhì)蛋白定量檢測,蛋白質(zhì)分子量檢測,WesternBlotting,生命科學(xué)基礎(chǔ)研究。
激發(fā)波長:275nm
電泳在凝膠成像內(nèi)部的合二一一體機(jī)
凝膠尺寸:102mm*86mm*1mm
電流:1A
電壓:400V
穩(wěn)定性RSD:4.5%以內(nèi)
檢測線性范圍:50-5000ng

