摘要:抗GFAP單克隆抗體可變區(qū)序列,包含兩種核苷酸序列,所述核苷酸序列分別為CM10330-VH和CM10330-VL。用GFAP蛋白作為抗原,免疫小鼠后,檢測(cè)得到相應(yīng)抗體表達(dá)呈陽(yáng)性的小鼠,分離其脾細(xì)胞后,融合脾細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞,在HAT培養(yǎng)基中培養(yǎng)后,檢測(cè)得到抗體表達(dá)陽(yáng)性克隆,提取陽(yáng)性雜交瘤細(xì)胞總RNA,以總RNA中的mRNA為模板,反轉(zhuǎn)錄得到相應(yīng)抗體基因的cDNA,再用特異引物PCR獲得相應(yīng)抗體重鏈可變區(qū)和輕鏈可變區(qū),并進(jìn)行克隆和測(cè)序。
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