摘要：本發(fā)明公開了利用切口酶恒溫擴(kuò)增靶核酸序列的方法，其包括以下步驟：a)使擴(kuò)增引物與核酸靶分子雜交；b)用DNA聚合酶合成雙鏈核酸；c)所述切口酶識別特異性核酸序列，在其中一條核酸鏈上切割形成一個切口；d)DNA聚合酶以切口為起點，以未被切斷的另一條核酸鏈為模板，合成新的雙鏈核酸，并將舊鏈剝離以作為下一輪核酸合成的模板，同時在新合成的雙鏈核酸上恢復(fù)切口酶識別位點；和e)重復(fù)進(jìn)行切割、延伸和剝離的步驟，以擴(kuò)增出靶核酸序列。本發(fā)明還公開了利用海藻糖提高切口酶反應(yīng)溫度使其能夠與熱穩(wěn)定DNA聚合酶配合使用的方法。本發(fā)明還公開了用于擴(kuò)增靶核酸序列的試劑盒及試劑盒在檢測傳染病病原體中的用途。利用本發(fā)明可制成操作簡單，低成本，便攜式的儀器，從而普及核酸診斷試劑。
- 專利類型發(fā)明專利
- 申請人杭州優(yōu)思達(dá)生物技術(shù)有限公司;
- 發(fā)明人尤其敏;胡林;汪凈;鐘華燕;
- 地址320012浙江省杭州市西湖區(qū)文化路460號文新科技樓東四樓
- 申請?zhí)?/b>CN200610057262.7
- 申請時間2006年03月10日
- 申請公布號CN100489112C
- 申請公布時間2009年05月20日
- 分類號C12P19/34(2006.01)I;C12Q1/68(2006.01)I;
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